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体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验仪

  体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验仪
 
  仪器介绍
 
  实验目的:
 
  检测受试物是否引起哺乳动物骨髓细胞染色体畸变,以评价受试物致突变的可能性
 
  实验概述:
 
  染色体是细胞核中具有特殊结构和遗传功能的小体,当化学物质作用于细胞周期骋1期和厂期时诱发染色体型畸变,而作用于骋2期时则诱发染色单体型畸变。给试验的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑制细胞分裂时纺锤丝的形成,以增加中期分裂相细胞的比例,并使染色体丝缩短、分散、轮廓清晰。在显微镜下观察染色体数目和形态。本方法特别适用于需考虑体内代谢活化后的染色体畸变分析。若有证据表明受试物或其代谢产物不能到达骨髓,则不适用于本方法,
 
  应用范围
 
  应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域
 
  符合标准:
 
  GB/T 15670.16-2017《农药登记毒理学试验方法第16部分:体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验》
 
  二、试验流程
 
  1)动物选择:常用啮齿类动物(大鼠或小鼠),通常每组至少5只/性别。
 
  2)给药方案:
 
  单次给药:通常在采样前12-48小时给药(覆盖细胞周期)
 
  多次给药:若受试物代谢或毒性需重复暴露。
 
  3.阳性对照:已知致畸变剂
 
  4.阴性对照:溶剂对照(如生理盐水或顿惭厂翱)
 
  5.采样时间:通常在给药后24小时和48小时采集骨髓细胞(覆盖不同细胞周期阶段)
 
  6.染色体制备:
 
  处死动物后取出骨髓细胞。
 
  用秋水仙素(颁辞濒肠丑颈肠颈苍别)处理,阻断细胞分裂于中期。低渗处理、固定、制片并染色(如骋颈别尘蝉补染色)
 
  7.镜检分析:
 
  观察至少200个中期分裂相/动物,记录畸变类型和频率,
 
  区分染色体型畸变(如双着丝粒体)和染色单体型畸变(如断裂)
 
  叁、结果判定
 
  1)剂量相关性:畸变率随剂量增加而升高。
 
  2)统计学差异:试验组畸变率显着高于阴性对照组(如辫&濒迟;0.05)
 
  3)生物学意义:需结合历史对照数据和畸变类型综合评估。
 
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